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CyTOF質(zhì)譜流式細(xì)胞儀

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產(chǎn)品簡介

1、產(chǎn)品簡介CyTOF2質(zhì)譜流式細(xì)胞儀是新一代的多參數(shù)流式細(xì)胞儀

詳細(xì)介紹

1、產(chǎn)品簡介

CyTOF2質(zhì)譜流式細(xì)胞儀是新一代的多參數(shù)流式細(xì)胞儀。它使用金屬元素做為流式抗體、染料的標(biāo)志物，利用質(zhì)譜對標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)行定量檢測。

這一技術(shù)的應(yīng)用，一方面使流式檢測通道數(shù)量大幅提高到了上百個，提升了從單個樣品獲得的信息量；另一方面避免了通道間信號的干擾，大大簡化了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，提升了數(shù)據(jù)的可靠性。

信號分子檢測數(shù)量的增加意味著對細(xì)胞群內(nèi)的表型進(jìn)行更精準(zhǔn)的觀察和分類，意味著對細(xì)胞株的均一性有更準(zhǔn)確的認(rèn)識，也意味著對細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)有更清晰的了解；同時它也為單細(xì)胞蛋白質(zhì)組的發(fā)展提供了新的研究手段。

2、儀器原理

CyTOF質(zhì)譜流式細(xì)胞儀的原理如下圖所示，它采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體或者染料）標(biāo)記或識別細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用感應(yīng)耦合等離子質(zhì)譜（ICP-MS）觀察單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，將原子質(zhì)量譜的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子數(shù)據(jù)，并通過專業(yè)分析軟件對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從而實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞表型和信號網(wǎng)絡(luò)的精細(xì)觀察[4] 。

3、應(yīng)用實(shí)例

（1）實(shí)現(xiàn)了骨髓等復(fù)雜細(xì)胞群體的精細(xì)免疫分群

質(zhì)譜流式細(xì)胞術(shù)實(shí)現(xiàn)了單個細(xì)胞上42個參數(shù)的同時測定；通過對13個表面抗原表達(dá)情況分析，對人骨髓細(xì)胞群進(jìn)行高精度的分型，全景展示了骨髓中造血系統(tǒng)不同分化階段細(xì)胞的具體組成 [3]。

上圖顯示的是CyTOF對人骨髓細(xì)胞的分型，圓圈的大小表示各群細(xì)胞所占的比例，顏色反映CD45RA在相應(yīng)群體中的表達(dá)水平。

（2）系統(tǒng)分析骨髓細(xì)胞群體信號通路

在精細(xì)分群的基礎(chǔ)上，CyTOF還可以檢測細(xì)胞內(nèi)各個信號分子的水平，從而實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)信號通路的系統(tǒng)性分析：

如圖中所示，在IL-7處理的條件下，骨髓細(xì)胞中T細(xì)胞內(nèi)pSTAT5的水平明顯升高[3]。

（3）研究基因在分化、發(fā)育過程中的表達(dá)變化

下圖顯示Pre-B細(xì)胞向成熟B細(xì)胞分化過程中，多個蛋白的表達(dá)變化情況 [3]：

（4）研究細(xì)胞亞群之間的功能聯(lián)系

CD8+T細(xì)胞25個Marker的表達(dá)數(shù)據(jù)經(jīng)PCA處理后，自動聚集成四個相連的細(xì)胞群。形象的說明了T細(xì)胞成熟的四個階段是一個連續(xù)的過程[1]：

（5）高通量藥物篩選

結(jié)合Barcorde細(xì)胞標(biāo)記技術(shù)，CyTOF可以一次檢測96個不同的樣品，通過對其20多個表面標(biāo)志和信號分子的檢測，細(xì)致分析各亞群細(xì)胞對每個藥物的不同反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)高通量的藥物篩選[2]。

4、相關(guān)文獻(xiàn)（附全文）

1. Newell, E.W., et al., Cytometry by time-of-flight shows combinatorial cytokine expression and virus-specific cell niches within a continuum of CD8+ T cell phenotypes. Immunity. 36(1): p. 142-52. 下載

2. Bodenmiller, B., et al., Multiplexed mass cytometry profiling of cellular states perturbed by small-molecule regulators. Nat Biotechnol. 30(9): p. 858-67.下載

3. Bendall, S.C., et al., Single-cell mass cytometry of differential immune and drug responses across a human hematopoietic continuum.
Science. 332(6030): p. 687-96. 下載

4. Bendall, S.C. and G.P. Nolan, From single cells to deep phenotypes in cancer. Nat Biotechnol. 30(7): p. 639-47.下載

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