人胰島素受體底物1(IRS1) ELISA 試劑盒

實驗原理

1. 抗體或抗原的吸附：將待測抗原或抗體吸附到固相載體上，常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學基團，能夠與待測抗原或抗體特異性結合。

2. 酶標記的抗體或抗原的結合：將酶標記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結合，形成酶標記的抗原-抗體復合物。酶標記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力，能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復合物。

3. 底物顯色反應：當酶標記的抗原-抗體復合物與底物溶液接觸時，酶能夠催化底物分解，產生顏色變化。通過測量顏色的變化程度，可以判斷待測抗原或抗體的濃度。

試劑盒性能

1. 檢測范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：檢測濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15%。

試劑盒組成

操作步驟

1. 樣品采集與處理

（1）血清：收集血液后，室溫放置30分鐘左右，待血液凝固后離心分離血清。

（2）血漿：收集血液后，加入適量抗凝劑（如EDTA），離心分離血漿。

（3）細胞培養(yǎng)上清液：收集細胞培養(yǎng)液，離心去除細胞殘骸，收集上清液。

2. 樣品稀釋

根據(jù)需要，將血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液進行適當稀釋。

3. 加樣與溫育

（1）將稀釋后的樣品加入已包被兔生長抑su抗體的酶標板孔中，每孔加入100μL。

（2）加入適量酶標二抗，每孔加入100μL。

（3）將酶標板放入37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

4. 洗板與顯色

（1）取出酶標板，用洗滌液洗3次，每次5分鐘。

（2）加入底物液，每孔加入100μL，放入37℃恒溫箱中溫育15分鐘。

（3）加入終止液，每孔加入50μL，混勻。

5. 測定與結果計算

（1）用酶標儀檢測各孔的光密度值（OD值），波長為450nm。

（2）根據(jù)標準品濃度與OD值的對應關系，計算出樣品中兔生長抑su濃度。

人胰島素受體底物1(IRS1) ELISA 試劑盒結果分析

根據(jù)標準品和樣本的OD值，繪制標準曲線，從而計算出樣本中角蛋白1（KRT1）的濃度。具體分析方法可參考試劑盒說明書或相關文獻。

注意事項

A 仔細閱讀說明書。

B 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。

C 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。

D 標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內無法實驗者，注意低溫保存。

E 準備好所有實驗額外所需物品，（比如移液器，試管，清洗器，酶標儀）。

F 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量。

G 檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件，所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。

H 檢查不穩(wěn)定或者變質的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑，比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液，可能在設計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之，必需充分混勻。而由于沉淀物的特性，在加入酶標板之，必需不停攪拌。

I 充分的孵育時間和溫度。

J 切勿使用不同生產批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。

K 在混合或溶解蛋白溶液時，避免泡沫產生。

L 在實驗開始之，安排好實驗流程。

M 在實驗開始之，清潔工作臺。

N 若有問題，應與我公司或代理商的技術支持聯(lián)系。

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