高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。LC-3000高效液相色譜儀是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。
LC-3000高效液相色譜儀使用過程中常見問題及其解決方法
系統
液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成(如圖1所示)。對于整個系統而言,柱子、泵和檢測器是核心部件,同時也是容易出事故的主要場所。
2 常見問題及解決方法
2.1 針對柱壓問題(表1)
柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定并不是指壓力值穩定于一個恒定值,而是指壓力波動范圍在50PSI之間。壓力過高、過低及波動較大都屬于柱壓問題,但柱壓的高低與色譜柱的種類、品牌、液相系統本身及使用的流動相種類相。值得注意的是在使用梯度洗脫時,進柱壓的平穩緩慢的變化是允許的。
在實際應用中柱壓過高可從以下幾個方面來考慮[1]。首先考慮柱子是否被堵,此時可更換一根新柱子進行檢測。